ਉਤਪਾਦ

ਮਨੁੱਖੀ ਅੰਤੜੀਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਕ ਵਿੱਚ ਅਲਫ਼ਾ-ਮੈਨੋਸੀਡੇਸ ਦੇ ਇੱਕ Ca2+-ਨਿਰਭਰ ਪਰਿਵਾਰ ਵਿੱਚ ਮਕੈਨਿਸਟਿਕ ਸੂਝ।

ਕੋਲੋਨਿਕ ਬੈਕਟੀਰੀਆ, ਬੈਕਟੀਰੋਇਡਜ਼ ਥੀਟਾਇਓਟਾਓਮਾਈਕ੍ਰੋਨ ਦੁਆਰਾ ਉਦਾਹਰਨ, ਖੁਰਾਕ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਅਤੇ ਮੇਜ਼ਬਾਨ ਗਲਾਈਕਨਾਂ ਨੂੰ ਪੌਸ਼ਟਿਕ ਤੱਤਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ ਲਈ ਗਲਾਈਕੋਸਾਈਡ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲੇਸਜ਼ (GHs) ਦੇ ਵੱਡੇ ਪਰਿਵਾਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਨੁੱਖੀ ਸਿਹਤ ਨੂੰ ਬਣਾਈ ਰੱਖਣ ਵਿੱਚ ਮੁੱਖ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਅਜਿਹੇ GH ਪਰਿਵਾਰ ਦੇ ਵਿਸਥਾਰ ਨੂੰ B. thetaiotaomicron ਜੀਨੋਮ ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤੇ 23 ਪਰਿਵਾਰ GH92 ਗਲਾਈਕੋਸੀਡੇਸ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਇੱਥੇ ਅਸੀਂ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਇਹ ਅਲਫ਼ਾ-ਮੈਨੋਸੀਡੇਸ ਹਨ ਜੋ ਹੋਸਟ ਐਨ-ਗਲਾਈਕਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਸਥਾਪਨ ਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਦੋ GH92 mannosidases ਦੀ ਤਿੰਨ-ਅਯਾਮੀ ਬਣਤਰ ਦੋ-ਡੋਮੇਨ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਪਰਿਵਾਰ ਨੂੰ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਕੈਟਾਲੀਟਿਕ ਸੈਂਟਰ ਡੋਮੇਨ ਇੰਟਰਫੇਸ 'ਤੇ ਸਥਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ Ca(2+)- ਵਿੱਚ ਹਾਈਡੋਲਾਈਸਿਸ ਲਈ ਐਸਿਡ (ਗਲੂਟਾਮੇਟ) ਅਤੇ ਬੇਸ (ਐਸਪਾਰਟੇਟ) ਸਹਾਇਤਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਨਿਰਭਰ ਢੰਗ.ਇਨਿਹਿਬਟਰਸ ਦੇ ਨਾਲ ਕੰਪਲੈਕਸ ਵਿੱਚ GH92s ਦੀਆਂ ਤਿੰਨ-ਅਯਾਮੀ ਬਣਤਰਾਂ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਵਿਧੀ ਅਤੇ ਸੰਰਚਨਾਤਮਕ ਯਾਤਰਾ ਦੀ ਸਮਝ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।Ca(2+) ਮੈਨਨੋਸਾਈਡ ਨੂੰ ਇਸਦੀ ਜ਼ਮੀਨੀ-ਅਵਸਥਾ (4)C(1) ਕੁਰਸੀ ਦੀ ਪਰਿਵਰਤਨ ਸਥਿਤੀ ਵੱਲ ਵਿਗਾੜਨ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮੁੱਖ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਕੈਮ.ਬਾਇਓਲ.6, 125-32, (2010)

ਕਨਕਨਾਵਲਿਨ ਏ-ਸੇਫਾਰੋਜ਼ ਕਾਲਮ 'ਤੇ ਓਵਲਬਿਊਮਿਨ ਗਲਾਈਕੋਸਪੈਰਾਗਾਈਨਜ਼ ਦੀ ਫਰੰਟਲ ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ।ਲੈਕਟਿਨ ਦੀ ਬਾਈਡਿੰਗ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਾ ਇੱਕ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਅਧਿਐਨ।

ਓਵਲਬੁਮਿਨ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ 10 ਗਲਾਈਕੋਸਪੈਰਾਗਾਈਨਜ਼ ਦੇ ਨਾਲ ਸੇਫਾਰੋਜ਼ 4ਬੀ-ਇਮੋਬਿਲਾਈਜ਼ਡ ਕੰਕਨਾਵਲਿਨ ਏ (ਕੋਨਾ) ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਫਰੰਟਲ ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਇਸ ਵਿਧੀ ਵਿੱਚ, ਇੱਕ ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਘੋਲ ਇੱਕ ConA-Sepharose ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਲਗਾਤਾਰ ਲਾਗੂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਲਿਊਸ਼ਨ ਫਰੰਟ ਦੀ ਰਿਟਾਰਡੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਤਾਕਤ ਦੇ ਮਾਪਦੰਡ ਵਜੋਂ ਮਾਪਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ConA ਨਾਲ ਹਰੇਕ ਸੈਕਰਾਈਡ ਲਈ ਡਿਸਸੋਸਿਏਸ਼ਨ ਸਥਿਰ (Kd) ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।p-nitrophenyl-alpha,D-mannoside ਦੇ ਬਾਈਡਿੰਗ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ Sepharose 4B 'ਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ConA ਦੀਆਂ ਬਾਈਡਿੰਗ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਜ਼ਰੂਰੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਹੀਂ ਬਦਲਦੀਆਂ ਹਨ।ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਹਰ ਇੱਕ ਓਵਲਬੁਮਿਨ ਗਲਾਈਕੋਸਪੈਰਾਗਾਈਨਜ਼ ਨੂੰ ਟ੍ਰਿਟਿਅਮ ਨਾਲ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ Kd ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ConA ਦੀ ਬਾਈਡਿੰਗ ਗਲਾਈਕੋਸਿਲ ਚੇਨ ਦੇ ਬਹੁਤ ਮਾਮੂਲੀ ਸੰਰਚਨਾਤਮਕ ਅੰਤਰਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕਾਫ਼ੀ ਬਦਲਦੀ ਹੈ।ਨਤੀਜੇ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ ConA ਇੱਕ ਖਾਸ ਗਲਾਈਕੋਸਿਲ ਚੇਨ ਬਣਤਰ, ਮੈਨ ਅਲਫ਼ਾ 1-6(ਮੈਨ ਅਲਫ਼ਾ 1-3)ਮੈਨ ਨੂੰ ਮਾਨਤਾ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ C-6-ਲਿੰਕਡ ਮੈਨਨੋਜ਼ ਦੀ C-3 ਸਥਿਤੀ 'ਤੇ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਇੱਕ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਿਲ ਗਰੁੱਪ ਖਾਲੀ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।