ਉਤਪਾਦ

ਅਸੀਂ ਪੋਲੀਥੀਲੀਨਾਈਮਾਈਨ (PEI) ਅਤੇ γ-ਪੌਲੀਗਲੂਟਾਮਿਕ ਐਸਿਡ (γ-PGA) ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਟਰਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਨਾਵਲ ਸਮਾਲ ਇੰਟਰਫੇਰਿੰਗ RNA (siRNA) ਡਿਲੀਵਰੀ ਸਿਸਟਮ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੇ ਚੁੱਪ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਅਤੇ ਕੋਈ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨਹੀਂ ਹੈ।PEI ਦੇ ਨਾਲ siRNA ਦੇ ਬਾਈਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸ ਕਣਾਂ ਦੇ ਆਕਾਰ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 73-102 nm ਅਤੇ ζ-ਸੰਭਾਵੀ ਵਿੱਚ 45-52 mV ਸਨ।PEI ਦੇ ਵਾਧੇ ਨਾਲ siRNA/PEI ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦਾ ਸਾਈਲੈਂਸਿੰਗ ਪ੍ਰਭਾਵ ਵਧਿਆ, ਅਤੇ 16 ਤੋਂ ਵੱਧ ਚਾਰਜ ਅਨੁਪਾਤ ਵਾਲੇ siRNA/PEI ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਨੇ ਮਾਊਸ ਕੋਲਨ ਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨ ਵਿੱਚ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ (ਕੋਲਨ 26/ਲੂਕ ਸੈੱਲ) ਨੂੰ ਨਿਯਮਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਗਟ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਨੋਕਡਾਊਨ ਦਿਖਾਇਆ।ਹਾਲਾਂਕਿ, siRNA/Lipofectamine ਕੰਪਲੈਕਸ ਅਤੇ siRNA/PEI16 ਕੰਪਲੈਕਸ ਵਿੱਚ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​cytotoxicity ਅਤੇ ਖੂਨ ਦਾ ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ।ਇੱਕ ਐਨੀਓਨਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਕੈਟੈਨਿਕ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਨੂੰ ਰੀਚਾਰਜ ਕਰਨਾ ਇਹਨਾਂ ਜ਼ਹਿਰੀਲੀਆਂ ਚੀਜ਼ਾਂ ਨੂੰ ਦੂਰ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਧੀਆ ਤਰੀਕਾ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਸ ਲਈ ਅਸੀਂ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਅਤੇ siRNA ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਨ ਲਈ γ-PGA ਦੇ ਜੋੜ ਦੁਆਰਾ PEI (ਚਾਰਜ ਅਨੁਪਾਤ 16) ਦੇ ਨਾਲ siRNA ਦੇ ਤੀਹਰੇ ਕੰਪਲੈਕਸ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਹਨ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਉਮੀਦ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, γ-PGA ਸਮੱਗਰੀ ਦੇ ਵਾਧੇ ਦੇ ਨਾਲ ਟੇਰਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦੀ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਘਟ ਗਈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦੀ ζ-ਸੰਭਾਵਨਾ ਘਟ ਗਈ।siRNA/Lipofectamine ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੇ ਨਾਲ ਤੁਲਨਾਤਮਕ ਇੱਕ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​​​ਸਾਈਲੈਂਸਿੰਗ ਪ੍ਰਭਾਵ ਇੱਕ ਐਨੀਓਨਿਕ ਸਤਹ ਚਾਰਜ ਦੇ ਨਾਲ γ-PGA ਸਮੇਤ ਟਰਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਵਿੱਚ ਖੋਜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਕੋਲੋਨ 26/ਲੂਕ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਟਰਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦੀ ਉੱਚ ਸ਼ਮੂਲੀਅਤ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਈਕ੍ਰੋਕੋਪੀ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਇੱਕ ਐਕਸੋਜੇਨਸਲੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫੈਕਟਡ ਜੀਨ ਦੇ ਨੋਕਡਾਉਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਬੀ 16-ਐਫ 10 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਹਾਉਸਕੀਪਿੰਗ ਜੀਨ, ਗਲਾਈਸੈਰਾਲਡੀਹਾਈਡ 3-ਫਾਸਫੇਟ ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨੇਸ (ਜੀਏਪੀਡੀਐਚ) ਦੇ ਨਾਕਡਾਊਨ ਵਿੱਚ ਵਿਚੋਲਗੀ ਕਰਨ ਲਈ ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਟਰਨਰੀ ਕੰਪਲੈਕਸ (siRNA/PEI16/γ-PGA12 ਕੰਪਲੈਕਸ) ਨੇ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ GAPDH ਨਾਕਡਾਊਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਅਸੀਂ ਇੱਕ ਉਪਯੋਗੀ siRNA ਡਿਲਿਵਰੀ ਸਿਸਟਮ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ।