ਉਤਪਾਦ

ਐਂਥ੍ਰਾਨਿਲਿਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਖੋਜ ਦੇ ਨਾਲ ਡੈਰੀਵੇਟਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਗਲਾਈਕੋਸਿਲਟ੍ਰਾਂਸਫੇਰੇਸ ਲਈ ਨਵੀਂ ਉੱਚ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਵਾਲੀ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਪਰਖ।

ਉੱਚ-ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਦੁਆਰਾ β1-4 ਗਲੈਕਟੋਸਿਲਟ੍ਰਾਂਸਫੇਰੇਸ (ਗੈਲਟੀ-1) ਅਤੇ α2-6 ਸਿਆਲਿਲਟ੍ਰਾਂਸਫੇਰੇਸ (ST-6) ਦੋਵਾਂ ਦੀਆਂ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਲਈ 2-ਅਮੀਨੋਬੈਂਜੋਇਕ ਐਸਿਡ (2AA; ਐਂਥ੍ਰਾਨਿਲਿਕ ਐਸਿਡ, AA) ਦੀ ਵਿਲੱਖਣ ਲੇਬਲਿੰਗ ਰਸਾਇਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਅਸੈਸ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਖੋਜ ਦੇ ਨਾਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (ਐਚਪੀਐਲਸੀ) (ਐਨੂਮੂਲਾ ਕੇਆਰ. 2006. ਗਲਾਈਕੋਪ੍ਰੋਟੀਨ ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਦੇ ਉੱਚ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਡੈਰੀਵੇਟਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿੱਚ ਤਰੱਕੀ। ਗੁਦਾ ਬਾਇਓਕੈਮ. 350:1-23)।N-Acetylglucosamine (GlcNAc) ਅਤੇ N-acetyllactosamine ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ GalT-1 ਅਤੇ ST-6 ਲਈ ਦਾਨੀਆਂ ਵਜੋਂ ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਅਤੇ uridine diphosphate (UDP)-galactose ਅਤੇ cytidine monophosphate (CMP)-N-acetylneuraminic acid (NANA) ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ AA ਦੇ ਨਾਲ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਆਮ-ਪੜਾਅ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ TSKgel Amide 80 ਕਾਲਮ ਉੱਤੇ ਸਬਸਟਰੇਟਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਯੂਨਿਟਾਂ ਨੂੰ ਉੱਚੇ ਖੇਤਰਾਂ ਤੋਂ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਡੈਰੀਵੇਟਾਈਜ਼ਡ ਮਾਪਦੰਡਾਂ Gal-β1-4GlcNAc ਅਤੇ NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc ਨਾਲ ਤੁਲਨਾ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਰੇਖਿਕਤਾ (ਸਮਾਂ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਕਾਗਰਤਾ), ਸ਼ੁੱਧਤਾ (ਅੰਤਰ- ਅਤੇ ਅੰਤਰ-ਸਾਧਨ) ਅਤੇ ਅਸੈਸ ਲਈ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਸਥਾਪਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਅਸੈਸ ਨੂੰ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀਆਂ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਲਾਭਦਾਇਕ ਪਾਇਆ ਗਿਆ।ਅਸੈਸ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਸਨ ਅਤੇ ਰਵਾਇਤੀ ਰੇਡੀਓਐਕਟਿਵ ਸ਼ੂਗਰ-ਆਧਾਰਿਤ ਮਾਪਾਂ ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਜਾਂ ਬਿਹਤਰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕਰਦੇ ਸਨ।ਪਰਖ ਫਾਰਮੈਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਹੋਰ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰਾਂਸ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਲਈ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਬਸ਼ਰਤੇ ਕਿ ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲਿਆਂ ਵਿੱਚ ਲੇਬਲਿੰਗ ਲਈ ਇੱਕ ਘਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅੰਤ ਹੋਵੇ।IgG ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਗਲਾਈਕੋਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲਿਆਂ ਲਈ ਇੱਕ ਪਰਖ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।IgG ਗਲਾਈਕੈਨਸ (ਬੀਅਨਟੇਨਰੀ G0, G1, G2, ਮੋਨੋ- ਅਤੇ ਡਿਸਏਲੀਲੇਟਿਡ) ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਛੋਟਾ HPLC ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਵਿਧੀ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਿਸ ਨੇ GalT-1 ਅਤੇ ST-6 ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਦਿੱਤੀ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਵਿਧੀ ਕਲੀਨਿਕਲ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਵਿੱਚ ਆਈਜੀਜੀ ਗਲਾਈਕਨਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਲਈ ਉਪਯੋਗੀ ਸਾਬਤ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।