ਉਤਪਾਦ

LecA (PA-IL) ਇੱਕ ਸਾਇਟੋਟੌਕਸਿਕ ਲੈਕਟਿਨ ਅਤੇ ਐਡੀਸਿਨ ਹੈ ਜੋ ਸੂਡੋਮੋਨਸ ਐਰੂਗਿਨੋਸਾ ਦੁਆਰਾ ਪੈਦਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਗਲੈਕਟੋਸਾਈਡਾਂ ਨੂੰ ਉੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸਬੰਧਾਂ ਨਾਲ ਜੋੜਦਾ ਹੈ।ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਐਕਸਟਰਸੈਲੂਲਰ ਮੈਟਰਿਕਸ ਦੇ ਇੱਕ lecA-egfp ਅਨੁਵਾਦ ਫਿਊਜ਼ਨ ਅਤੇ ਇਮਯੂਨੋਬਲੌਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ, ਅਸੀਂ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ lecA ਨੂੰ ਬਾਇਓਫਿਲਮ-ਵਧੇ ਹੋਏ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਪੌਲੀਸਟੀਰੀਨ ਅਤੇ ਸਟੇਨਲੈਸ ਸਟੀਲ ਦੋਵਾਂ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਅਸੈਸਾਂ ਵਿੱਚ, ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਦੀ ਡੂੰਘਾਈ ਅਤੇ ਸਤਹ ਕਵਰੇਜ ਨੂੰ lecA ਦੇ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦੁਆਰਾ ਘਟਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ LecA-ਵੱਧ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਤਣਾਅ PAO-P47 ਵਿੱਚ ਵਧਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਪੇਰੈਂਟ ਸਟ੍ਰੇਨ, PAO-P47 ਦੁਆਰਾ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਦੀ ਸਤਹ ਕਵਰੇਜ, ਪਰ ਸਟੀਲ ਕੂਪਨ 'ਤੇ lecA ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ ਵੀ ਆਈਸੋਪ੍ਰੋਪਾਈਲ-ਬੀਟਾ-ਡੀ-ਥਿਓਗਲੈਕਟੋਸਾਈਡ (ਆਈਪੀਟੀਜੀ) ਜਾਂ ਪੀ-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੇਨਿਲ-ਐਲਫਾ-ਡੀ-ਗੈਲੈਕਟੋਸਾਈਡ (ਆਈਪੀਟੀਜੀ) ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਦੁਆਰਾ ਰੋਕਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। NPG).ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹਨਾਂ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਗਲੈਕਟੋਸਾਈਡਾਂ ਦੀ ਅਣਹੋਂਦ ਵਿੱਚ ਬਣੀਆਂ ਪਰਿਪੱਕ ਜੰਗਲੀ ਕਿਸਮ ਦੀਆਂ ਬਾਇਓਫਿਲਮਾਂ ਨੂੰ IPTG ਦੇ ਜੋੜ ਨਾਲ ਖਿੰਡਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) ਨੂੰ ਜੋੜਨਾ ਜਿਸਦਾ P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n ਲਈ ਉੱਚ ਸਬੰਧ ਹੈ, ਦਾ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਦੇ ਗਠਨ ਜਾਂ ਫੈਲਣ 'ਤੇ ਕੋਈ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨਹੀਂ ਪਿਆ।P. aeruginosa PAO1 ਦਾ ਪਲੈਂਕਟੋਨਿਕ ਵਾਧਾ IPTG, NPG ਜਾਂ NPF ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਸੀ, ਅਤੇ ਨਾ ਹੀ ਇਹ ਸਟ੍ਰੇਨ ਕਾਰਬਨ ਸਰੋਤਾਂ ਵਜੋਂ ਇਹਨਾਂ ਸ਼ੱਕਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਸੀ, ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਕਿ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਦੇ ਗਠਨ 'ਤੇ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਪ੍ਰਭਾਵ LecA-ligand ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਰੋਕ ਦੇ ਕਾਰਨ ਸੀ। ਬਾਈਡਿੰਗਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਸਟੀਲ ਕੂਪਨਾਂ 'ਤੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਅਧੀਨ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਬਾਇਓਫਿਲਮਾਂ ਲਈ ਵੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ, ਜੋ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ LecA ਵੱਖ-ਵੱਖ ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਤਹਿਤ ਪੀ. ਐਰੂਗਿਨੋਸਾ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਆਰਕੀਟੈਕਚਰ ਵਿੱਚ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਉਂਦਾ ਹੈ।

ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਪੱਤਿਆਂ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਅਲਫ਼ਾ-ਐਲ-ਫਿਊਕੋਸੀਡੇਸ (EC 3.2.1.51) ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ ਜੋ ਕਿ xyloglucan oligosaccharides ਦੀ ਸਾਈਡ ਚੇਨ ਤੋਂ t-fucosyl ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਨੂੰ ਛੱਡਣ ਦੇ ਯੋਗ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਐਸਡੀਐਸ-ਪੇਜ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ ਬੈਂਡ ਰੈਂਡਰ ਕਰਨ ਲਈ ਗੋਭੀ (ਬ੍ਰਾਸਿਕਾ ਓਲੇਰੇਸੀਆ) ਦੀਆਂ ਪੱਤੀਆਂ ਤੋਂ ਸਮਾਨ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਵਾਲਾ ਅਲਫ਼ਾ-ਐਲ-ਫਿਊਕੋਸੀਡੇਸ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਸ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਬੈਂਡ ਤੋਂ ਦੋ ਪੇਪਟਾਇਡ ਕ੍ਰਮ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ, ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਇੱਕ ਅਲਫ਼ਾ-ਫਿਊਕੋਸੀਡੇਸ ਲਈ ਇੱਕ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਜੀਨ ਕੋਡਿੰਗ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਜਿਸਨੂੰ ਅਸੀਂ AtFXG1 ਕਾਲ ਕਰਨ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕਰਦੇ ਹਾਂ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਅਲਫ਼ਾ-ਐਲ-ਫਿਊਕੋਸੀਡੇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਸਮਰੂਪਤਾ ਵਾਲਾ ਇੱਕ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਜੀਨ ਵੀ ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਅਸੀਂ ਇਸਨੂੰ AtFUC1 ਨਾਮ ਦੇਣ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕੀਤਾ ਹੈ।AtFXG1 ਅਤੇ ATFUC1 ਦੋਵੇਂ ਹੀਟਰੋਲੋਗਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਿਚੀਆ ਪੇਸਟੋਰਿਸ ਸੈੱਲਾਂ ਅਤੇ ਅਲਫ਼ਾ-ਐੱਲ-ਫਿਊਕੋਸੀਡੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਕਲਚਰ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਲੁਕਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।AtFXG1 ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਲਫ਼ਾ-L-fucosidase xyloglucan XXFG ਤੋਂ oligosaccharides ਦੇ ਨਾਲ ਨਾਲ 2'-fucosyl-lactitol ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਸਰਗਰਮ ਸੀ ਪਰ p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਨਹੀਂ ਸੀ।ਹਾਲਾਂਕਿ, AtFUC1 ਵਿਪਰੀਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਗਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸਿਰਫ 2'-ਫਿਊਕੋਸਿਲ-ਲੈਕਟੀਟੋਲ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਸਰਗਰਮ ਸੀ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਪਹਿਲਾਂ ਦਾ xyloglucan metabolism ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।