ਉਤਪਾਦ

ਯੂਕੇਰੀਓਟਿਕ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਚਾਰ ਡੀਓਕਸੀਰੀਬੋਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡ ਟ੍ਰਾਈਫੋਸਫੇਟਸ (dNTPs) ਦੀ ਮਿੰਟ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦਾ ਇੱਕ ਨਾਜ਼ੁਕ ਸੰਤੁਲਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਸਿਰਫ ਕੁਝ ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਲਈ ਕਾਫੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ dNTP ਦੀ ਘਾਟ ਅਤੇ ਸਰਪਲੱਸ ਦੋਵਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦਰਾਂ ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ, ਨੁਕਸਦਾਰ ਡੀਐਨਏ ਮੁਰੰਮਤ ਜਾਂ ਮਾਈਟੋਕੌਂਡਰੀਅਲ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਕਮੀ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।dNTPs ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇੱਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਪਰਖ ਦੁਆਰਾ ਮਾਪਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਖਾਸ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਵਿੱਚ ਰੇਡੀਓਐਕਟਿਵ dATP (ਜਾਂ dATP ਲਈ ਪਰਖ ਵਿੱਚ ਰੇਡੀਓਐਕਟਿਵ dTTP) ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨਾ ਅਣਜਾਣ dNTP ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਕਲੇਨੋ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਅਣਜਾਣ dNTP ਲਈ ਅਨੁਸਾਰੀ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੀ ਥਾਂ ਲੈ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਕੁਝ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ dNTPs ਦੇ ਵੱਡੇ ਅਨੁਮਾਨ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਹੁਣ ਹਰੇਕ dNTP ਲਈ ਪਰਖ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਜੋ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਇਨਕਾਰਪੋਰੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਚਦੀਆਂ ਹਨ।dTTP ਅਤੇ dATP ਅਸੈਸ ਲਈ ਇਹ ਕਲੇਨੋ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਅਤੇ ਲੇਬਲ ਕੀਤੇ dATP (ਜਾਂ dTTP) ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਕਾਫੀ ਹੈ;dCTP ਅਤੇ dGTP ਲਈ ਸਾਨੂੰ ਟੀ ਕਲੇਨੋ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਜਾਂ ਥਰਮੋ ਸੀਕਵੇਨੇਜ਼ ਨਾਲ ਬਦਲਣਾ ਪਿਆ।ਅਸੀਂ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਕੁਝ ਪਿਛਲੀਆਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਇਨਕਾਰਪੋਰੇਸ਼ਨ ਨੇ dGTP ਅਤੇ dCTP ਲਈ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਮੁੱਲਾਂ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ।